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使用時需留心的細節：
（1）不管是試劑盒，還是其它產品，在使用之前都要仔細閱讀說明書，同時確定試劑盒是不是在有效期內。
（2）標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份，短期內無法實驗者，注意低溫保存。
（3）根據檢測標本數量確定所需試劑盒的量。
（4）按說明書將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑盒，DIY夾心法ELISA常見技術指南。
（5）選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對，若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體。
（6）若使用過氧化物酶作為顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
（7）當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
（8）準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等。