本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專(zhuān)用于定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的降鈣素(CT)蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于鈣磷代謝調(diào)節(jié)、甲狀腺髓樣癌及骨代謝疾病研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠降鈣素(CT)elisa試劑盒 | 英文名稱(chēng) | CT ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-1003E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理:

?固相化?:微孔板預(yù)先包被抗小鼠 CT 抗體。
?結(jié)合?:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,CT 被固相抗體捕獲。
?檢測(cè)?:加入化的抗小鼠 CT 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
?測(cè)定?:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 樣本處理
1) 血清:無(wú)菌無(wú)熱源采血管采集,避免溶血 / 脂血;1000×g 離心 10 min 取上清,-20℃分裝,禁反復(fù)凍融。
2) 血漿:EDTA / 檸檬酸鹽抗凝(慎用肝素),離心分離上清。
3) 細(xì)胞上清:1000×g 離心除碎片,-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿:預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿,高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴(yán)禁加NaN3抑制 HRP 活性;杜絕溶血、渾濁、污染樣本;全程低溫防降解;超標(biāo)樣本用試劑盒專(zhuān)用稀釋液稀釋?zhuān)瑢?shí)驗(yàn)建議設(shè)置復(fù)孔。
操作步驟:

1.試劑準(zhǔn)備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)渲葡盗袧舛葮?biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液。
2.實(shí)驗(yàn)流程
加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品,37℃孵育。
加酶標(biāo)抗體:除空白孔外,每孔加入酶標(biāo)抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。
洗滌:棄去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復(fù)洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。
顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。
終止:每孔加入終止。
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