本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的胰島素降解酶(IDE)濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于胰島素清除、蛋白降解、糖代謝穩(wěn)態(tài)及淀粉樣蛋白代謝研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠胰島素降解酶(IDE)elisa試劑盒 | 英文名稱 | IDE ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-5300E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理:

固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 IDE 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,IDE 被固相抗體捕獲。
檢測(cè):加入化的抗大鼠 IDE 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 樣本類型與處理
?血清?:使用無(wú)熱原/內(nèi)毒素試管采集,避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清,-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
?血漿?:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心后取上清。
?細(xì)胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒,-70℃保存。
?組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清,-20℃保存。
2. 注意事項(xiàng)
樣本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測(cè)波動(dòng),建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟:

1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min;濃縮洗滌液按說(shuō)明書稀釋混勻。
2.設(shè)孔加樣設(shè)空白、標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣品孔,精準(zhǔn)加樣,封板。
3.溫育結(jié)合37℃孵育 30–60 min,棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡,甩干拍干,重復(fù)3–5 次。
5.加酶結(jié)合物除空白孔外每孔加 HRP 標(biāo)記液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結(jié)合游離酶,控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù)加終止液變色穩(wěn)定后,立刻酶標(biāo)儀讀 OD 值。
9.結(jié)果計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合,換算樣本濃度。
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