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產品介紹

Grace昆蟲培養基（Grace's Insect Medium）最初設計為支持澳大利亞白星橙天蠶蛾 (Antherea eucalypti) 細胞 的生長，是對Wyatt培養基的改良，以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用這種培養基建立了第一個連續細胞系。適 當補充添加劑后，該基本培養基已用于培養各種昆蟲細胞，包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲。該培養基主要作為 培養基基礎，用于培養Sf9 和Sf21細胞系，也用于其它鱗翅類昆蟲細胞系的生長和維持。

TNM-FH昆蟲培養基是改進的Grace's昆蟲培養基，適當補充添加劑后，可用于各種鱗翅類昆蟲細胞的培養。

本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質、脂類或任何生長因子，故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。

該培養基中碳酸氫na含量為350mg/L，是為了與空氣里的二氧化碳起緩沖作用而存在，不足以于5%二氧化碳環境中達到平衡，而可以直接于無二氧化碳培養箱中培養昆蟲細胞。為保持本產品的良好使用效果，請勿進行凍融處理。

培養基主要成份表

（-）  酚   紅

（+）  700mg/L   D-葡萄糖

（+）  600mg/L   L-谷氨酰an

（+）  350mg/L   NaHCO3

PH       6.1 ---6.4

運輸和保存

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸（儲存條件2-8℃ 避光儲存）產品保質期12個月。

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。

1.配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需培養基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。