商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | SNB-19人膠質(zhì)瘤細胞細胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6236 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
商品詳情：
別稱 SNB.19; SNB19
年齡（性別） 男；75歲
組織來源 星形膠質(zhì)瘤（U-251MG）
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
背景描述 Established from the surgical resection of a left parieto-occipital glioblastoma from a 47-year-old man in 1980; cells were described in the literature to secrete plasminogen activator, to be clonogenic in soft agar and to be tumorigenic in nude mice; DNA fingerprinting showed unequivocally that SNB-19 is a subclone of the astrocytoma cell line U-251 MG)。（STR檢測位點同U-251MG)
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:4-1:6
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~24-36 hours
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
保藏機構(gòu) DSMZ; ACC-325
細胞系培養(yǎng)步驟：
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?
細胞接收后的處理：
1）SNB-19人膠質(zhì)瘤細胞細胞系收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔肝內(nèi)膽管上皮細胞 | Medium M3基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞 | iPS 細胞鋪底工作液 |
兔支氣管平滑肌細胞 | β－巰基乙醇 |
兔肺成纖維細胞 | 肝素 |
小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞 | 血管內(nèi)皮生長因子 |
小鼠羊膜間充質(zhì)干細胞 | 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta |
小鼠臍帶血間充質(zhì)干細胞 | 人白細胞介素4 |
兔肺微血管內(nèi)皮細胞 | 真jun劑，2000 × |
兔肺動脈內(nèi)皮細胞 | 1.8ml細胞凍存管 |
兔肺動脈平滑肌細胞 | C17.2小鼠神經(jīng)干細胞 |
兔肺動脈外膜成纖維細胞 | HL-1小鼠心肌細胞 |
兔II型肺泡上皮細胞 | MEF(絲裂C處理)小鼠胚胎成纖維細胞 |
兔氣管上皮細胞 | RAG小鼠腎腺癌細胞 |
兔氣管平滑肌細胞 | CHL中國倉鼠肺細胞 |
兔支氣管上皮細胞 | H4-II-E-C3 大鼠肝癌細胞 |
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