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產(chǎn)品展示   Products原代細胞>>其它原代細胞>>羊原代外周血NK原代細胞
 
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產(chǎn)品名稱:
羊原代外周血NK原代細胞
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報價:
2600
產(chǎn)品特點:
羊原代外周血NK原代細胞公司正在出售的產(chǎn)品:蘄蛇探針法PCR鑒定試劑盒氣單胞菌PCR檢測試劑盒氣單胞菌通用PCR檢測試劑盒氣單胞菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)氣單胞菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒氣單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒氣管比翼線蟲PCR檢測試劑盒氣管比翼線蟲PCR檢測試劑盒
  羊原代外周血NK原代細胞的詳細資料:

羊原代外周血NK原代細胞

商品屬性:

羊原代外周血NK原代細胞

規(guī)格

5×105cells/T25或1mL凍存管

貨號

EY-XY4042

種屬來源

組織來源

外周血

生長特性

懸浮生長

形態(tài)特征


形態(tài):
培養(yǎng)基:羊外周血NK細胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)

 


羊原代外周血NK原代細胞

細胞基本屬性:

羊原代外周血NK原代細胞

種屬來源

組織來源:外周血外周血

生長特性:懸浮生長

產(chǎn)品規(guī)格5×105cells/T251mL凍存管
換液頻率2-3天換液一次

消化液

產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹:自然殺傷細胞(natural killer cellNK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān),而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。一種穩(wěn)定表達在NKLAK細胞表面的LAK-1分子,120kDaNK細胞在IL-2條件下培養(yǎng)20LAK-1仍為陽性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。                  自然殺傷細胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF) NK細胞有刺激作用。IL-2IL-12IFN-αTNF-α以及白細胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin,LR) NK細胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用, 體外培養(yǎng)時加入上述細胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素 (PG)E1E2D2和腎上腺皮質(zhì)激素等對NK細胞的活性有抑制作用。

 


羊原代外周血NK原代細胞

原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括:

羊原代外周血NK原代細胞
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后,過濾、計數(shù)?:將消化后的細胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計數(shù)。

五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作:

羊原代外周血NK原代細胞
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)

傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)

傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)

傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法:

1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

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