細(xì)胞名稱 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；SK-N-BE(2)
形態(tài)特性: 神經(jīng)母細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 1972年11月從一們多次及放療的擴(kuò)散性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株。該細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。有報(bào)道稱SK-N-BE(2)細(xì)胞的飽和濃度超過(guò)1x106細(xì)胞/平方厘米。細(xì)胞形態(tài)多樣，有的有長(zhǎng)突觸，有的呈上皮細(xì)胞樣。細(xì)胞會(huì)聚集，形成團(tuán)塊并浮起。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況: P(36+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；SK-N-BE(2) | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63938 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
脫鎂螯合酶檢測(cè)試劑盒
3非食用5-溴-2-羥吲哚Human SPRR1B ELISA Kit
雜交瘤株；LT005拉丁屬名: Aspergillus fumigatus Fresen5-溴-2-羥吲哚Human SPZ1 ELISA Kit
雜交瘤株；LT004用途: 分類5-硝基吲哚-2-酮Human SPRR2D ELISA Kit
雜交瘤株；SC20150701D注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用5-硝基吲哚-2-酮Human SQRDL ELISA Kit
雜交瘤株；SC20150701A拉丁屬名: Xenophilus azovorans5-(甲基硫代）噻吩-2-羧酸Human SQLE(Squalene monooxygenase) ELISA Kit
雜交瘤株；2G9A3-35H11拉丁屬名: Debaryomyces hansenii5-(甲基硫代）噻吩-2-羧酸Human SPRR2F ELISA Kit
雜交瘤株；5H1E9E8D7H12拉丁屬名: Enterobacter sakazakii果糖二酮Human SRA1 ELISA Kit
雜交瘤株；CD98-3H3用途: 教學(xué)科研果糖二酮Human CA4(Carbonic anhydrase 4) ELISA Kit
雜交瘤株；CD98-2D3拉丁屬名: Shewanella sp.2-噻吩乙Human SPO11 ELISA Kit
雜交瘤株；CD98-2C8拉丁屬名: Bifidobacterium adolescentis Reuter2-噻吩乙Human SPATA7 ELISA Kit
雜交瘤株；FABP 4C2拉丁屬名: Amauroderma rugosum苊烯Human SPATA6 ELISA Kit
雜交瘤株；1A6D3注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用苊烯Human SPATS2L ELISA Kit
雜交瘤株；2C11D12拉丁屬名: Shewanella haliensis胸腺嘧啶-1-乙酸Human SPCS1 ELISA Kit
雜交瘤株；1H7F8拉丁屬名: Dermatophilus congolensisFmoc-β-homoaspartic acidHuman SPHK1 ELISA Kit
雜交瘤株；3H3F6拉丁屬名: Sporobolomyces salmonicolor4-氨基-2-氯苯甲Human SPDYA ELISA Kit
雜交瘤株；7H8注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用4-氨基-2-氯苯甲Human SPHK1-Phospho-Ser225 ELISA Kit
雜交瘤株；2-189-H-1拉丁屬名: Staphylococcus equorum4-氨基-2-氯苯甲Human CADM3(Cell adhesion molecule 3) ELISA Kit
雜交瘤株；43-H-8規(guī)格: 20片/盒,2盒3-氟-5
神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；SK-N-BE(2)D-四氫藥根13063-54-2英文名：(R)-(+)-Corypalmine
英文別名：dl-Tetrahydrojatrorrhizine
CAS登錄號(hào)：13063-54-2
分子式：C20H23NO4
分子量：341.16
分子結(jié)構(gòu)：
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來(lái)源：夏天無(wú)原藥材
藥理藥效：藥根在治療炎癥、細(xì)菌和病感染、糖尿病、心血管疾病、精神疾病等多方面具有藥效作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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