產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 胚腎細(xì)胞；2V6.11
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 這株細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293衍化而來。293細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細(xì)胞。隨后,用包含編碼E424K的Ad5E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來。載體包含SV40病毒序列。2V6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用環(huán)分離單得到。2V6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)的人腺病毒E434KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測。這株細(xì)胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品名稱 | 胚腎細(xì)胞；2V6.11 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63496 |
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實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
rmICOS/Fc, CF (100 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；HBBADCPPF1-4C RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmICAM-5/Fc, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小
(1,1,3,四甲基丁基)酚(>93.0%(GC))CACYBP Antibody羧基酸
2,2-雙(羥基)烷(>99.0%(GC))Phospho-CaMKII (Tyr231) Antibody2--(三氟甲基)酸
2,2-雙()-1,1-二烷(>98.0%(GC))CaMKII-α Antibody芐基酮
2,2-雙()-1,1-二(>99.0%(GC))PI3 Kinase Class III (D4E2) Rabbit mAb6-溴己酸酯
2,二酚(>98.0%(GC))PI3 Kinase Class III (D4E2) Rabbit mAb三氟甲酸甲酯
2,二酚(>98.0%(GC))ATF-3 (D2Y5W) Rabbit mAb溴
1,2-二溴-烷(1mg/mL的甲溶液)Phospho-TORC1/CRTC1 (Ser151) Antibody氟硫酚
鄰二甲酸丁芐酯(>97.0%(GC))RagC Antibody2-氨基-2-基丁酸
鄰二甲酸二戊酯(>98.0%(GC))CaMKII (pan) Antibody聚磺酸鈉
鄰二甲酸二丁酯(>97.0%(GC))Sox9 (D8G8H) Rabbit mAb (Biotinylad)甲氨基鹽酸鹽
鄰二甲酸二環(huán)己酯(>99.0%(GC))Dicer Antibody氨基-2,6-二吡啶
鄰二甲酸二酯(>98.0%(GC))Dicer Antibody2-(N-Boc-哌啶基)
鄰二甲酸雙(2-基己基)酯(>98.0%(GC))Drosha (D28B1) Rabbit mAbBoc-L-
鄰二甲酸二酯(>98.0%(GC))Drosha (D28B1) Rabbit mAb(R)-2-氨甲基-1-N-Boc-吡咯烷
鄰二甲酸二己酯(>98.0%(GC))CaMKI-δ Antibody10-氮(雜)蒽
三丁基化錫(>97.0%(T))Neuropilin-2 (D39A5) XP® Rabbit mAb-2-氟酚
3,并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))Neuropilin-2 (D39A5) XP® Rabbit mAb-氟酚
雙(酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))GST (26H1) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-甲基-6-三氟甲基吡啶-羧酸
二甲基二硫代氨酸鋅(>95.0%(T))GSTP1 (3F2) Mouse mAb異噻唑啉酮
并紅紫4B[pH指示劑]Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) Antibody5-溴-2,二氟甲
間甲酚紫鈉鹽[pH指示劑]Phospho-Erk5 (Thr218/Tyr220) Antibody硝基芐鹽酸鹽
五甲氧基紅(>98.0%(HPLC))Phospho-Erk5 (Thr218/Tyr220) Antibody溴芐鹽酸鹽
甲基橙(>95.0%(W))Erk5 Antibody6--1-羥基并三氮唑
溴酚藍(lán)[pH指示劑]Cathepsin B (G60) Antibody6-溴甲酯
基橙[pH指示劑]TrkC (C44H5) Rabbit mAb6-甲氧基甲酯
氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))SimpleChIP® HUWE1 Intron 26 Control Primers三環(huán)己基膦
2,5-二酚(加約20%水濕潤,本品干重約為5g)(>99.0%(T))Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb2-甲
間二酚藍(lán)[pH指示劑]Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb酸薄荷酯
2-酚鈉鹽(>99.0%(HPLC)(T))PCAF (C14G9) Rabbit mAbalpha-溴-甲氧基酮
甲酚紅鈉鹽[pH指示劑]PCAF (C14G9) Rabbit mAb2-疏基吡啶
雙(2,二)酸酯(>98.0%(HPLC))PRMT4/CARM1 (C31G9) Rabbit mAb4,4'-偶氮雙(基戊酸)
(1R,2R)-2-(萘-2,二甲酰亞基)環(huán)己甲酸(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser890) AntibodyH-ORN(CBZ)-OH
(1S,2S)-2-(萘-2,二甲酰亞基)環(huán)己甲酸(>98.0%(HPLC)(T))NHERF1 (A140) Antibody2,5-二氟甲
(1S,2S)-2-(蒽-2,二甲酰亞基)環(huán)己甲酸(>97.0%(HPLC))
Cathepsin B (H190) Antibody (Mouse Preferred)甲基環(huán)戊二二聚體
Nα-(5-氟-2
um)10%FBS
rmHAI-2B, CF (10 UG)細(xì)胞名稱: 中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1cDNA DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
胚腎細(xì)胞；2V6.11人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒NP-YELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人視黃誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒NP-YELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒NP-YELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒NP-YELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒NSEELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒NSEELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒NSEELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒NSEELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
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