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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
申克孢子細(xì)菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Sporothrix schenckii | EY00P9360 |
產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽性對照（用第4號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
（標(biāo)準(zhǔn)品）甲基橙 ACS reagent,85 %Human DSE(Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit
甲基紅鈉鹽 INDHuman DSP(Desmoplakin) ELISA Kit
甲基紅鈉鹽 ACS reagent, 95 %Human DR-70TM(Tumor Marker DR-70 For Lung Cancer) ELISA Kit
（標(biāo)準(zhǔn)品）亞甲基藍(lán) Biological stainHuman CX43(Connexin 43) ELISA Kit
（標(biāo)準(zhǔn)品）亞甲基藍(lán) 超純級,Dye content, >90%(HPLC)Human DBP/DNA Binding Protein(DNA Binding Protein) ELISA Kit
間甲基紅 IndicatorHuman EAR2(Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 2) ELISA Kit
孔雀石綠 Biological stainHuman Dyn(Big Dynorphin) ELISA Kit
磷酸二氫（標(biāo)準(zhǔn)品）甲基紫 ARHuman CYSLTR2(Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit
長春（標(biāo)準(zhǔn)品）甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)Human CSF2Rβ(Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit
（標(biāo)準(zhǔn)品）萘酚綠B ≥80% (HPLC)Human DGAT1(Diacylglycerol O-acyltransferase 1) ELISA Kit
（標(biāo)準(zhǔn)品）1,10-菲羅啉，一水 AR,98%Human CSNK2A2(Casein Kinase 2, alpha 2 Polypeptide) ELISA Kit
（標(biāo)準(zhǔn)品）鄰苯二酚紫 INDHuman CTAPIII(Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit
鈉一水合物（標(biāo)準(zhǔn)品）鄰菲羅啉鹽酸鹽 98%Human CX26(Connexin 26) ELISA Kit
西替利雜質(zhì)A(1-[（4-氯苯）苯甲基]哌)（標(biāo)準(zhǔn)品）紅 ARHuman COL5α2(Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit
異環(huán)磷酰化合物III（標(biāo)準(zhǔn)品）1,10-菲羅啉(無水) 99%Human COL6(Collagen Type VI) ELISA Kit
申克孢子細(xì)菌探針法PCR熒光定量試劑盒*基鳥苷合酶1(TGS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)二氯(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
Tomoregulin 1蛋白(TR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)二乙二二乙(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
Tomoregulin蛋白(TR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)二乙二二乙(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
轉(zhuǎn)化因子2β(TRA2β)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)二乙二二乙(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
tRNA異戊基轉(zhuǎn)移酶1(TRIT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙二丁(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
雙解絲蛋白1(TWF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙二丁(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
Tsukushin蛋白(TSK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
雙解絲蛋白2(TWF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙(色譜級) 質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
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