細(xì)胞名稱(chēng) 支氣管上皮樣細(xì)胞；BEAS-2B
形態(tài)特性: 上皮樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一正常人的支氣管上皮組織。后經(jīng)Ad12SV40病毒感染并。該細(xì)胞可用于檢測(cè)化學(xué)和生物制劑的致癌作用。
培養(yǎng)條件: LCH-8
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: PN16
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法（-）
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
支氣管上皮樣細(xì)胞；BEAS-2B | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63881 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
膜聯(lián)蛋白-A5IgG抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞（B類(lèi)）；P19-CAG-tTA-1F3形態(tài)特性: 多角Annexin A5 IgG antibody
膜聯(lián)蛋白-A5IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞（B類(lèi)）；F9-CAG-tTA-4D6形態(tài)特性: 多角Annexin A5 IgM antibody
糖基化終末產(chǎn)物檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞（B類(lèi)）；P19-CAG-tTA-3C3形態(tài)特性: 多角advanced glycation end products
酪酪肽3-36檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-D3形態(tài)特性: 克隆樣Peptide YY3-36
PIM1激酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞（B類(lèi)）；P19-CAG-tTA-3C8形態(tài)特性: 多角PIM1 kinase
抗流行性出血熱病IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類(lèi)）；Pan02-CAG-tTA-2D1形態(tài)特性: 多角Anti-Epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody
腸道病71型IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類(lèi)）；Pan02-CAG-tTA-3E6形態(tài)特性: 多角enterovirus-71 IgM antibody
核轉(zhuǎn)錄因子p52檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類(lèi)）；Pan02-CAG-tTA-4C5形態(tài)特性: 多角Nuclear factor-kappa B P52
COL12A1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類(lèi)）；Pan02-CAG-tTA-4B3形態(tài)特性: 多角Collagen alpha-1(XII) chain
糖化鐵蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤（B類(lèi)）；C3110D2B2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣glycosylated ferritin
PL7抗體；抗蘇氨酰tRNA合成酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤（B類(lèi)）；Z172A4C4C6F3G12形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣anti-PL7-antibody
Ⅷ型膠原α2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤（B類(lèi)）；Z173B1C8A11E7B8E2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣collagen alpha-2(VIII) chain
抗細(xì)胞膜DNA抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類(lèi)）；Pan02形態(tài)特性: 多角cell membrane associated DNA antibody
抗著絲點(diǎn)抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤（B類(lèi)）；C3110D2E11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣anti-centromere antibody
抗α-胞襯蛋白抗體IgG；IgA檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤（B類(lèi)）；Z1510A2G6A2C7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣α-FodrinIgG；IgA
Abl交互子3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤（B類(lèi)）；Z2310B6B11B1G4F3C11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣ABI gene family member 3
腫瘤壞死因子受體γ檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 長(zhǎng)白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞；201184形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Tumor Necrosis Factor receptor γ
支氣管上皮樣細(xì)胞；BEAS-2B氧代川南亭分子式：C19H18O5
分子量：323
CAS登錄號(hào)：新品待定
分子結(jié)構(gòu)：
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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