細(xì)胞名稱(chēng) 腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞；SW-13
形態(tài)特性: 上皮樣；多角
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞是1971年8月從55歲的患有腎上腺皮質(zhì)癌的白人女性患者中分離建立的。該患者的病理診斷為Ⅳ級(jí)腎上腺皮質(zhì)原發(fā)性小細(xì)胞癌。電鏡顯示，該細(xì)胞有許多球形縫隙連接(BGJ)。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium10%FBS
傳代方法: 1:3~1:8傳代；每周2~3次。
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法（-）
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞；SW-13 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63249 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
瑞格非尼FXR2 Antibody對(duì)
MK-2866FEZ1 (D9R8Q) Rabbit mAb氧基酚
XTT鈉鹽PI3 Kinase p110α (C73F8) Rabbit mAb6-溴-2-并噻唑啉酮
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)PI3 Kinase p110α (C73F8) Rabbit mAb三基基溴化
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯SMYD2 Antibody鹽酸多巴
馬西替坦;ACT064992PI3 Kinase p110γ Antibody1,二(溴甲基)
組蛋白去酰化酶抑制劑(M 344)DR4 (D9S1R) Rabbit mAb對(duì)二
2--5-甲酰;GW 9662Cleaved Caspase-7 (Asp198) (D6H1) Rabbit mAb (PE Conjuga)二甲氧基膦酰基酸叔丁酯
2-硝基咪唑 PI3 Kinase p110α Antibody對(duì)二甲
(三氟甲基)-1H-咪唑 MLH1 (D38G9) Rabbit mAb
2-甲基-三氟甲基咪唑 MLH1 (D38G9) Rabbit mAb1,2-二烷
2-氨基咪唑硫酸鹽 PI3 Kinase p85 (19H8) Rabbit mAbN-基
奧當(dāng)卡替(MK-0822)PI3 Kinase p85 (19H8) Rabbit mAbN-基二
硝基兒茶酚EOMES (D8D1R) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2,二-7-甲氧基喹唑啉
硝基兒茶酚MHC Class II (I-A/I-E) (M5/114.15.2) Rat mAb (FITC Conjuga)甲基基硫
曲格列酮Acetyl-Histone H3 (Lys36) (D9T5Q) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)二甲基二硫
Tri-Methyl-Histone H3 (Lys79) Antibody
(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-SRF (Ser103) Antibodyβ-羥基異戊酸
鹽酸馬尼地平Rab10 Antibody2-酰
鹽酸馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAbD-溴氨酸
二氫睪酮,雄諾龍F(tuán)XR1 (L662) Antibody甲巰脯酸
多拉菌素STOP (175) Mouse mAb2,二甲基吡咯
3,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸，塞羅寧SOD1 (71G8) Mouse mAb甲氧基芐硫
Corylifol A(標(biāo)準(zhǔn)品)SOD1 (71G8) Mouse mAb2,5-二甲基呋喃
溴芬酸鈉EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb氟
溴芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb間
鹽酸氟哌噻噸EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb間二甲
茶多酚;綠茶提取物Fer (5D2) Mouse mAb1,3,5-三溴
四氫姜黃素 Ron (1B5) Mouse mAb2,二羥基-6-甲基嘧啶
管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Non-phospho (Active) β-Canin (Ser33/37/Thr41) Antibody甲基哌啶
2’-酰基毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)THEM2 AntibodyN-甲基哌啶
2-[2-(2,2,2-三氟氧基)氧基]基溴 WASP (D9C8) Rabbit mAbL-高
吡咯喹啉醌;Cytochrome c Antibody己二酸單酯
吡咯喹啉醌二鈉鹽;維生素鈉鹽Cytochrome c Antibody1-(基)哌
鹽酸右美托咪定CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb (PE Conjuga)甲酸酯
地夫可特ATP2A1/SERCA1 (A988) Antibody溴-1-
腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞；SW-13小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒apo-A1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒apo-A1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒apo-A1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠羥脯氨(Hyp)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
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