綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
阿薩斯絲孢酵母 | Trichospor | EY-J963511 |
資源名稱: 阿薩斯絲孢酵母
種屬: Trichosporon asahii
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: YM 培養(yǎng)基：酵母提取物，3.0 g 麥芽提取物，3.0 g 葡萄糖，10.0 g 蛋白棟，5.0 g 瓊脂，20.0 g 蒸餾水1000 ml ，pH 6.2 +/- 0.2
生長(zhǎng)條件: 25℃，好氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
Tyomyces│sp. 中文名稱：干酪菌Tyomyces│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度：96%
Thermoanaerobacr│cellulolyticus 中文名稱：解纖維素?zé)釁捬鯒U菌Thermoanaerobacr│cellulolyticus分離基物:溫泉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:高溫厭氧分解纖維素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:484生長(zhǎng)條件:65℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：96%
Arthrobacr│sulfonivorans 中文名稱：食砜節(jié)桿菌Arthrobacr│sulfonivorans分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：98%
Corynebacrium│pseudodiphtheriticum 中文名稱：類白喉棒桿菌Corynebacrium│pseudodiphtheriticum分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:檢測(cè)、培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30-37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
Roseomonas│cervicalis 中文名稱：頸玫瑰單胞菌Roseomonas│cervicalis分離基物:石油污染土提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:以菲、蒽、芴作為碳源生長(zhǎng)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：98%
Pseudomonas│syringae pv.theae 中文名稱：丁香假單胞菌茶致病變種Pseudomonas│syringae pv.theae分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：
Bacillus│muralis 中文名稱：壁芽孢桿菌Bacillus│muralis分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：99%
Rhodococcus│zopfii 中文名稱：佐氏紅球菌Rhodococcus│zopfii分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以100mg/L的酚為碳源培養(yǎng)，24h內(nèi)對(duì)100mg/L的酚降解率99%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：99%
阿薩斯絲孢酵母GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser) 兔抗粘附多肽抗體王不留行FMOC-L-β-高亮氨Human MPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit
GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體牛膽Fmoc-3-L-氨基丁Human FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit
gremlin 骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體Fmoc-L-beta-高異亮氨Human FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit
GnRHR 釋放激素受體抗體火麻仁Fmoc-L-beta-高苯氨Human FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit
GRP75 G蛋白偶聯(lián)受體75抗體石菖蒲噻吩-2-頻哪酯Human FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit
GPA/GYPA/CD235a 血型糖蛋白A（涎糖蛋白）抗體土荊皮（金錢松）噻吩-2-頻哪酯Human FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit
GPR78 G蛋白偶聯(lián)受體78抗體百合噻吩-2-頻哪酯Human FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) ELISA Kit
KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯(lián)受體54抗體肉蓯蓉2-乙基苯肼 鹽鹽Human VLA (Very Late Appearing Antigen) ELISA Kit
資源名稱: 沼澤紅假單胞菌（菌液）
種屬: Rhodopseudomonas palustris
提供形式: 僅提供菌液
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；。應(yīng)用于番茄紅素、水質(zhì)凈化和作為飼料添加劑等方面。
培養(yǎng)基: 112 Van Niel's Yeast Agar：K2HPO4 1.0 g，MgSO4 0.5 g，酵母提取物 10.0 g，蒸餾水 1000 ml，pH 7.0-7.2。121℃，15min。
生長(zhǎng)條件: 30℃，厭氧,在鎢絲燈下培養(yǎng)
生長(zhǎng)特性: 光合細(xì)菌
存儲(chǔ)條件: 2-8℃。
產(chǎn)品名稱 | 沼澤紅假單胞菌（菌液）價(jià)格 |
英文名稱 | Rhodopseudomonas palustris |
貨號(hào) | EY-J963214 |
公司代理ATCC菌種，質(zhì)量保證，為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
菌種的培養(yǎng)：
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明：
1、安瓿瓶開封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel. 中文名稱：杏鮑菇（斜面）Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel.提供形式:試管斜面安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25-28℃，好氧 純度：97%
Shigellaflexneri 中文名稱：福氏志賀氏菌Shigellaflexneri安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2 純度：≥99%
嗜冷芽孢桿菌 中文名稱：Bacilluspsychrophilus=Sporosarcinapsychrophila嗜冷芽孢桿菌分離基物:土壤安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)冷激蛋白培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2、121生長(zhǎng)條件:15℃ 純度：98%
Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei 中文名稱：類干酪乳桿菌類干酪亞種Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei分離基物:奶類制品。安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:58生長(zhǎng)條件:37℃ 純度：98%
Acinetobacrvenetianus 中文名稱：威尼斯不動(dòng)桿菌Acinetobacrvenetianus分離基物:海灘上焦油安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃ 純度：97%
Arthrobacrwoluwensis 中文名稱：ArthrobacrwoluwensisArthrobacrwoluwensis分離基物:人血安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:109生長(zhǎng)條件:37℃ 純度：97%
Streptomycesthermoviolaceussubsp.thermoviolaceus 中文名稱：熱紫鏈霉菌熱紫亞種Streptomycesthermoviolaceussubsp.thermoviolaceus分離基物:新鮮的馬和豬的糞便的混合物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:162163生長(zhǎng)條件:37-45℃ 純度：β-型, >90.0%(T)
Campylobacr jejuni 中文名稱：空腸彎曲菌Campylobacr jejuni提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制。研究、質(zhì)量控制，《GB/T 4789.9-2014空腸彎曲菌檢驗(yàn)》陽(yáng)性對(duì)照菌株，《GB 4789.28 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:布氏肉湯：胰蛋白胨 10.0g，蛋白胨 10.0g，葡萄糖 1.0g ，酵母浸膏 2.0g 5.0g，亞氫鈉(NaHSO3) 0.1g，蒸餾 1000mL。將各成分溶于蒸餾中。121℃高壓滅菌15min。終pH7.0.。FBP濃原液：亞鐵(FeSO4) 2.5g ，焦亞鈉(Na2S2O5) 2.5g，鈉(sodium pyruva) 2.5g；將各成分溶于100mL蒸餾中，經(jīng)0.20μm濾膜過(guò)濾除菌，存于4℃。每100mL經(jīng)滅菌的基礎(chǔ)液中加1mL，混勻。（注：如實(shí)驗(yàn)需要可加入1號(hào)抗生素液和2號(hào)抗生素液）。1號(hào)抗生素溶液： 0.75 g，氧芐氨嘧乳鹽(trimethoprimlacta) 0.38g ， 250 000 IU 將各成分溶于500mL蒸餾中，經(jīng)0.20μm濾膜過(guò)濾除菌。每100mL經(jīng)滅菌的基礎(chǔ)液中加1Ml。2號(hào)抗生素溶液：(rifampicin) 0.2g，氧芐氨嘧乳鹽 0.2g， 200 000 IU，(actidione) 2.0g 。將各成分置200mL容量瓶中，加入95%乙醇50mL，振搖使溶解，加入蒸餾至200mL。過(guò)濾除菌，每100mL經(jīng)高壓滅菌的基礎(chǔ)液中加1mL。傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無(wú)菌或培養(yǎng)基:充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無(wú)菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。生長(zhǎng)條件:37℃，微需氧。生長(zhǎng)特性G-輕度彎曲桿菌，氧化酶、接觸酶陽(yáng)性，尿素酶陰性，42℃生長(zhǎng)，25℃不生長(zhǎng)，馬尿鹽解試驗(yàn)陽(yáng)性，不發(fā)酵糖類。微需氧，適溫度為37~42℃。存儲(chǔ)條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度：β-型, >90.0%(T)
沼澤紅假單胞菌（菌液）價(jià)格假單胞F瓊脂人神經(jīng)細(xì)胞 原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Protein A 蛋白A
假單胞P瓊脂人神經(jīng)細(xì)胞 原代骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基GST-Tag protein 重組-轉(zhuǎn)移酶
煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB)人神經(jīng)細(xì)胞 原代滑膜皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Cholesterol
煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB)人小腦顆粒細(xì)胞 原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Beta-Amyloid(1-16) β淀樣肽1-16（多肽蛋白）
EC肉湯人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞 原代神經(jīng)元細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Beta-Amyloid (31-35) β淀樣肽31-35（多肽蛋白）
EC肉湯人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-貼壁生長(zhǎng) 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Beta-Amyloid(1-28) β淀樣肽1-28（多肽蛋白）
伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB)人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長(zhǎng) 原代單核細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Beta-Amyloid(1-40) β淀樣肽（1-40）（多肽蛋白）
伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB)人少突膠質(zhì)細(xì)胞 原代軟骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀樣肽1-40
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4.過(guò)濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
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