產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專門檢測(cè)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬媾疫錐蟲探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | Trypanosoma equiperdum | EY00P9474 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照（用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
Abl型胞質(zhì)底物四乙基氯化銨 98%Human EXO5 (Exonuclease V) ELISA KIT
Abltide(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸 97%Human FCHO1 (F-BAR domain only protein 1) ELISA KIT
Ac-[Asn30,Tyr32]-降鈣素（8-32）(Ⅰ型鮭魚)異丁酰乙酸乙酯 98%Human FCHO2 (F-BAR domain only protein 2) ELISA KIT
Ac-[Cys(Acm)33,42]-表皮生長(zhǎng)因子（33-42）酰，小鼠對(duì)氟苯甲酸 98%Human EXTL1 (Exostosin-like 1) ELISA KIT
Ac-[D-Lys2,Sar3]-促黑激素興奮因子4-氟甲苯 98%Human FERMT1 (Fermitin family homolog 1) ELISA KIT
Ac-[DTrp16]-內(nèi)皮素-1（16-21），人3-氟苯甲酸 98%Human FLAD1 (FAD synthase) ELISA KIT
Ac-[Lys0,Nle3]- g2-促黑激素，酰2-氟苯甲 98%Human ESPL1 (Separin) ELISA KIT
Ac-[Leu28,31]-神經(jīng)肽Y3-氟苯甲 97%Human FTO(Alpha-ketoglutaRate-dependent dioxygenase FTO) ELISA Kit
Ac- [Nle4,DPhe7] a-促黑激素（4-10），酰對(duì)氟苯甲 98%Human FASTK (Fas-activated serine/threonine kinase) ELISA KIT
Ac-[Pro18, Asp21] β-淀粉樣蛋白（17-21），酰異丁酰乙酸甲酯 98%Human EPS15 (Epidermal growth factor receptor substrate 15) ELISA KIT
Ac-[Tyr1,D-Arg2]-生長(zhǎng)激素釋放因子（1-29）酰，人乙酰氯 AR,98.5%Human EPHB4 (Ephrin type-B receptor 4) ELISA KIT
Ac-[Tyr1,D-Phe2]-生長(zhǎng)激素釋放因子（1-29）酰，人乙酰氯 CP,98.0%Human TUFM (Elongation factor Tu, mitochondrial) ELISA KIT
Ac-a-降鈣素基因相關(guān)肽（19-37），人乙酰氯 99%，無(wú)色Human EEF2 (Elongation factor 2) ELISA KIT
Ac- a-內(nèi)啡肽酰氯 98%Human EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) ELISA KIT
Ac-β-內(nèi)啡肽，牛，駱駝，綿羊，琥珀酸二甲酯 98%Human ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) ELISA KIT
馬媾疫錐蟲探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒原鈣黏素β10(PCDHβ10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙基叔丁基(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)
原鈣黏素β11(PCDHβ11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)對(duì)羥基苯甲酸正丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
原鈣黏素β13(PCDHβ13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)溴代異烷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)
原鈣黏素β14(PCDHβ14)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙酸芐酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
原鈣黏素β15(PCDHβ15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乙酸芐酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
原鈣黏素α13(PCDHα13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-溴(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(N)
原鈣黏素α4(PCDHα4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鄰苯二甲酸丁芐酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)
原鈣黏素α5(PCDHα5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鄰苯二甲酸丁芐酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
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